Методы определения глюкозы и электролитов

Современные подходы к
исследованию гемостаза
Гильманов Александр
Жанович
Кафедра лабораторной
диагностики ИПО Башкирского
медицинского университета
г. Уфа
ИССЛЕДОВАНИЕ ГЕМОСТАЗА
• I этап (клинический) - тщательный сбор жалоб и
анамнеза
• II этап (лабораторный):
а) скрининговые тесты (коагуляционное и
тромбоцитарное звенья гемостаза)
б) уточняющие тесты (в зависимости от клиники и
результатов лабораторного скрининга)
Взятие крови из вены для
исследования гемостаза
 После инфузии выждать 1 час.
 Не брать кровь из внутривенного катетера !
 В лаборатории должны знать, когда и что в/в
вливалось пациенту и когда была взята кровь.
 Взятую кровь сохранять в закрытой пробирке, как
можно быстрее доставить в лабораторию (45 мин –
6-8 час).
 Лучшие результаты получаются с вакуумными
системами.
Влияние внутривенных инфузий и
трансфузий на результаты анализов
Препараты
Аналиты
Изменения
Комментарии
Декстраны
Тромбиновое время, АЧТВ
↑
Замедл. на 5-10 с
Мочевина
↓
Разведение
Общий белок (биур.метод)
Ложное ↑
Хлопья, муть
Группа крови
Псевдоагглютинация
γ-глобулин
Серол. реакции (IgM, IgG)
Ложно(+) результаты
Электролиты
Na, K, Mg, Ca, …
↑
Введенные в-ва
Глюкоза
Глюкоза
↑
Введенные в-ва
Фосфат, калий
↓
Выброс инсулина
Амилаза, билирубин
↓ до 15%
Особ. у новорожд.
Плазма,
ЭР-масса
рН крови ↓ (метаб.ацидоз), калий ↑, ЛДГ ↑, своб.Hb ↑ (гемолиз)
Коагуляционные тесты
↑↓
Связывание Са,
восполнение
факторов
Гепарин
Коагуляционные тесты
↑
Замедление
свертывания
Вакуумные пробирки для коагулологии
1. Обязательно правильное соотношение цитрат / кровь:
недостаток цитрата
избыток цитрата
быстрое свертывание пробы,
замедление свертывания.
Неполное заполнение = повышение концентрации цитрата в пробе,
существенное (>10%) удлинение АЧТВ и ПВ.
HCT – от 30 до 55 %.
2. Аккуратное перемешивание крови с цитратом, 3-4 переворачивания
(слишком энергичное перемешивание => активация тромбоцитов).
3. Хранение – при комнатной температуре
(нарушение температурного режима => гемолиз + активация ТЦ).
Взятие крови в обычную пробирку



Утром, натощак, широкой иглой (20-21G, >0,7 мм)
«Щадящая» венепункция, наложение жгута - ≤ 1 мин
(иначе ↑ фибринолиз), отбрасывание первых 2-3 мл
крови (или использование ее для получ-я сыворотки).
Соотношение кровь : АК = 9:1.
При HCT = 35-50% - 0,5 мл цитрата + кровь до 5 мл.
При HCT <35% или >50% - расчет по формуле Ингрема:
100 − HCT (%)
V цитрата ( мл) = V пробирки ( мл) ×
595 − HCT (%)

Цитрат – 3,8 г Na3С6Н3О7 ⋅ 5,5Н2О или 3,2 г Na3С6Н3О7 ⋅
2Н2О в 100 мл воды, устойчив при +4оС ≤ 1 нед

Тщательное, но осторожное перемешивание крови с
цитратом, хранение при комнатной температуре.
Получение плазмы
ЦЕНТРИФУГИРОВАНИЕ - не позднее 30-60 мин после
взятия крови, при комнатной to.

Богатая ТЦ плазма - 150 g / 5 мин.
(охлаждение не допускается !)

Бедная ТЦ плазма (БТП) – 1700-1900 g / 15 мин.

Плазма для исследования ВА – двукратное ЦФ.
Отделение плазмы от осадка – в течение 1 ч после
взятия крови, перенос во вторичные пластиковые или
силиконированные пробирки пипеткой с пластиковым
наконечником.
Хранение плазмы






При комнатной температуре - до 4 ч (АЧТВ и др.),
до 24-48 ч (ПВ / МНО, в первичных вакуумных пробирках).
При гепаринотерапии – не более 1 ч.
Замораживание – только БТП, при (-20) – (-70) оС;
хранение в замороженном виде – до 4 нед при -20оС.
Быстрое размораживание в теплой воде при 37оС.
Тщательное, но осторожное перемешивание.
Исследование – в течение 1 ч после размораживания.
Лабораторное исследование системы
гемостаза
 «Глобальные» тесты гемостаза (на цельной крови)
 Тесты плазменного звена гемостаза
 Тесты тромбоцитарного звена гемостаза
 Тесты состояния эндотелия и сосудистой стенки
Глобальные тесты гемостаза
ВРЕМЯ СВЕРТЫВАНИЯ ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ (по Ли-Уайту):

в стеклянной пробирке при 20-25о С – 6-11 мин
Кровь
пациента
Активация
Нестандартизовано,
большой
разброс
результатов…
Методика
Сухарева
в капиллярах
ТЦ
Тк
ан
ев
ой
ть
пу
й
и
н
ен
тр XII
у
XI
Вн
IX I
II
+V
Вн
еш
ни
й
пу
VI
ть
I
Общий путь
X
+V
Образование тромбина
II
Образование фибрина
I
ф
ак
то
р
III
Тест ВСК (интерпретация)
Норма - 6-11 мин (при комнатной температуре).
↑ - Гипокоагуляция:
− выраженный дефицит фибриногена и факторов внутреннего
пути (расходование / снижение синтеза)
− действие ингибиторов (гепарина, антител)
− значительная гемодилюция
↓ - КЛИНИЧЕСКИ МАЛОИНФОРМАТИВНО:
- ошибка при взятии крови – травматичность процедуры.
- гиперактивация плазменных факторов внутреннего пути
(беременность, онкология… ), повышенная вязкость крови и т.д.
Основное применение теста ВСК - экспресс-диагностика грубых
сдвигов гемостаза.
Тест может выполняться вне КДЛ, силами нелабораторного
персонала (врач, фельдшер, процедурная сестра).
ВРЕМЯ СВЕРТЫВАНИЯ ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ после контактной
активации (ВСКа, АВС, ACT) – при добавлении стандартного
активатора (каолина, цеолита).
РОС-тест. Экспресс-анализаторы. Норма – 80-120 сек.
Активатор
Интраоперационный
мониторинг
гемостаза
(АИК, введение
гепарина и
протамин-сульфата)
+ экспрессопределение
резистентности к
гепарину
+ Активация
ТЦ

Венозная /
капиллярная
кровь
пациента
Тк
ан
ев
ой
ть
пу
й
ни
ен I
тр XI
у
XI
Вн
IX I
II
+V
Вн
еш
ни
й
пу
VI
ть
I
Общий путь
X
+V
Образование тромбина
II
Образование фибрина
I
ф
ак
то
р
III
•
•
•
•
Тесты плазменного гемостаза
Лабораторный тест
ДОЛЖЕН ИМЕТЬ
установленные:
 Тесты «внутреннего» и «внешнего»
пути активации гемостаза
диагностическую
значимость
 Тесты фибринообразования
чувствительность
и специфичность
метод калибровки
(стандартизации)
систему контроля
качества
 Количество / активность
отдельных факторов гемостаза
 Тесты системы фибринолиза
 Тесты антикоагулянтной системы
Тесты внутреннего пути активации
гемостаза
АЧТВ, АПТВ
-активированное
частичное тромбопластиновое время

CaCl2
Фосфолипиды
+ активатор
Плазма
пациента,
бедная ТЦ
Тк
ан
ев
ой
ф
ак
Вн
то
еш
р
ни
III
й
пу
VI
ть
I
ь
ут
п
ий
нн I
е
р XI
ут
н
XI
В
IX
II
VI
Общий путь
X
V
Образование тромбина
II
Образование фибрина
I
Тест АЧТВ
Норма - 20-45 сек (зависит от наборов и прибора).
↑ - ГИПОКОАГУЛЯЦИЯ:
− дефицит факторов внутреннего пути (снижение синтеза,
ДВС во II–III фазе, болезни печени, лечение АНД... )
− действие ингибиторов свертывания (гепарин, ПДФ, антитела)
− м.б. избыток цитрата / недостаток крови.
↓ - ОБЫЧНО НЕ ИМЕЕТ КЛИНИЧЕСКОГО ЗНАЧЕНИЯ:
ошибка взятия крови – недостаток цитрата, попадание
тканевого фактора в пробирку.
- [ избыток / активация факторов внутреннего пути (беременность,
онкология…) ] => нужно исследовать маркеры активации
свертывания.
Индекс АЧТВ = АЧТВ пациента / АЧТВ рефер.плазмы. N = 0,8-1,2.
Тесты внешнего пути гемостаза
ПВ (ПТИ, ПО, % по Квику)
– протромбиновое время
(индекс, отношение)

Тк
ан
ев
ой
ф
Вн
ак
то
еш
р
ни
й
пу
VI
ть
I
ь
ут
п
ий
нн I
е
р XI
ут
н
XI
В
IX
II
VI
Общий путь
X
V
Образование тромбина
II
Тромбопластин
+ Са2+
Плазма / кровь
пациента
Образование фибрина
I
Плазму пациента нельзя охлаждать (холодовая активация ф.VII).
Зависимость ПВ
от % протромбина (тест Квика)
12,5 %
25 %
50 %
100 %
Норма >70 %
Merlin medical
ПВ зависит от:
 активности тромбопластина (она нестабильна) => индексы ПВ:
ПТИ = (ПВ донора / ПВ пациента) × 100%. Норма = 85-115%.
ПО = ПВ пациента / ПВ донора.
Норма = 0,85-1,15.
 чувствительности тромбопластина к нехватке ф.VII, X, V, II.
Для стандартизации исследования ПВ, особенно у пациентов, принимающих непрямые антикоагулянты, используется международное
нормализованное отношение:
МНО = (ПО)МИЧ
МИЧ – международный индекс чувствительности (стандартизованный параметр тромбопластина). Желателен МИЧ <1,5.
Зависимость ПВ от % протромбина
(тромбопластины с разным МИЧ)
Н.А.Липатова с соавт. (2006)
Тест протромбинового времени (ПВ)
↑ ПВ и МНО (↓ % по Квику, ↓ ПТИ) - ГИПОКОАГУЛЯЦИЯ:
- дефицит факторов внешнего пути (VII, X, V, II, фибриноген):
тяжелые болезни печени, гиповитаминоз К / лечение АНД,
поздние стадии ДВС…
- действие антикоагулянтов (гепарин, ПДФ, антитела).
↓ ПВ, МНО (↑ ПТИ, ↑ % по Квику) – клинически малозначимо
- ошибка взятия крови - попадание кусочков стенки вены в
пробирку
- [ гиперактивность факторов внешнего пути: повреждение сосудов,
травмы,канцероматоз… + беременность и роды ].
Норма МНО = некорректное понятие !
Целевое значение МНО при лечении АНД – 2,0–3,5.
ПВ капиллярной крови

Тромбопластин + Са2+
Капиллярная кровь
с цитратом
Взятие крови должно быть
минимально травматичным !
Консервант на основе цитрата +
капиллярная кровь
Время хранения пробы до
анализа – до 8 ч.
Меньшая точность и
воспроизводимость анализа.
Калибратор – лиофилизированная
РНП.
Необходим учет гематокрита.
Предпочтительно выполнение
теста на специальном
коагулометре.
Картриджные коагулометры
CoaguCheck XS
+ INRatio, I-stat…
Тесты: ПВ, МНО
Тесты образования фибрина
КОНЦЕНТРАЦИЯ ФИБРИНОГЕНА
Гравиметрический способ (по Рутберг):
1 мл плазмы + тромбопластин + CaCl2,
сгусток извлекают, отжимают на фильтре, подсушивают и взвешивают. (10-20 мг)×0,25 = фибриноген в г/л (в норме 2-4 г/л).
При ДВС, гепаринотерапии –
+ гепасорб или
эхитокс
Тромбопластин
+ Са2+
Плазма
пациента
Концентрация фибриногена
-Клоттинг-методика (по Клаусу) - время свертывания
разведенной плазмы избытком высокоактивного тромбина
(на коагулометре, в норме 2-4 г/л (1,8-3,5).
- Турбидиметрический метод, «кинетический» метод
со змеиными ядами (рептилазой), ИФА-, ИХЛ-методы

Время (в секундах)
Высокоактивный
тромбин
370С
Плазма, разведенная
имидазол. буфером 1:10
60
30
1:40
1:30
Сгусток
1:20
10
6
3
1:10
1:5
0,2
0,4
0,6
1,0
Фибриноген в г/л
2,0
4,0
6,0
Интерпретация результатов
определения фибриногена
↑
- острофазовая реакция (воспаление, инфекции, травмы,
ожоги, послеоперационный период, ОИМ…), болезни
соединительной ткани, злокачественные новообразования...
В норме м.б. при беременности и во время месячных.
↓
- гиперпотребление – образование микросгустков (ДВС,
травмы,
ожоги,
шок,
тяжелый
токсикоз),
действие
фибринолитиков;
- уменьшение синтеза – тяжелые поражения печени.
Тромбиновое время (ТВ)
«Фибриноген + антитромбины»
- для контроля терапии фибринолитиками и гепарином
неразведенная плазма + тромбин --> сгусток фибрина
Норма – 12-16 (10-20) сек на коагулометре или вручную.
↑
- гипофибриногенемия, (дисфибриногенемии)
- действие гепарина, ПДФ, парапротеинов…
↓
- МАЛОЗНАЧИМО / гиперфибриногенемия.
НЕ ГИПЕРКОАГУЛЯЦИЯ !
Маркеры повреждения эндотелия
1. ↑ Фактор Виллебранда (кол-во, активность)
2. ↓ ТPA, тромбомодулин
3. ↑ PAI-1, эндотелин, молекулы адгезии
( ICAM-1, VCAM-1, P- и E-селектины…)
Маркеры активации плазменного гемостаза
1. Ранние – фрагменты протромбина F1+2,
комплекс тромбин-антитромбин (Т-АТ)
2. В момент образования сгустка – фибринмономеры (FM), фибринопептид А (FP А)
3. Поздние - продукты деградации фибрина (FDP),
D-димер
Предикторы: ↑ фVIII, фибриноген, ↓ АТ III, ПрС /ПрS
Паракоагуляционные пробы
-
этаноловая
слишком низкая чувствительность и специфичность;
β-нафтоловая
выполнение нецелесообразно.
протаминсульфатная
о-фенантролиновая проба (РФМК-тест) – нестандартизована, имеет полуколичественный характер…
РФМК = ФМ + ПДФ + ПДф
↑
РФМК - активация свертывания (и фибринолиза):
- тромбофилии, тромбозы, злокачественные новообразования,
ДВС крови, послеоперационный период, действие протеаз и
фибринолитиков …
- ошибка взятия крови (травматичная процедура, запоздалое
и/или плохое перемешивание с антикоагулянтом).
D-димер
 Продукт распада фибрина, но не фибриногена =>
наиболее надежный маркер образования / лизиса
фибриновых сгустков.
 Определяется точными иммунологическими методами.
 Инерционный параметр (Т1/2=24 ч).
 На результаты определения мало влияют
техника взятия крови, примесь тромбоцитов и т.д.
 Тест D-димера отражает "итоговую" эффективность антитромботической терапии.
В результате гепаринотерапии и лечения клексаном
у онкологических больных уровень D-димера снижается в 1,5-2,5 раза.
Отсутствие D-димера = отсутствие тромбов
Контингент, подлежащий обследованию на
D-димер
в первую очередь
1. Пациенты с подозрением на тромбоз (клинические проявления ДВС, ТГВ и ТЭЛА), а также с
повышенным риском тромботических
осложнений (мерцательная аритмия и др.)
2. Больные, которым предстоит обширная
операция.
3. Пациенты, которым нужно оценить эффективность антитромботической терапии (в т.ч. при
онкологии).
Тесты активности фибринолиза
1. Лизис эуглобулинов – XIIa-калликреин-зависимый фибринолиз
↑
(укороченный вариант; N = 4-12 мин)
- снижение уровня плазминогена, и/или
- недостаточная активация фибринолиза (тяжелые болезни
печени, передозировка трасилола и др.)
2. Плазминоген (стрептокиназный тест).
N = 80-120% от уровня нормальной плазмы.
↓ - снижение уровня плазминогена:
- гиперпотребление - тромбозы, ДВС крови, действие
стрептокиназы и активных протеаз;
- уменьшение синтеза - тяжелые болезни печени...
Тесты антикоагулянтной системы
Антитромбин III (количество) - ИХЛ, ИФА
Антитромбин III (активность) – по инактивации стандартного
раствора тромбина при добавлении плазмы пациента:
1. Клотинговый метод (Абильдгаард, 1970) – трудоемок,
нестабильные результаты…
2. Метод с хромогенным субстратом (фотометрический) –
точнее, удобнее в работе
Норма: 75-140% от уровня нормальной плазмы.
↓
- гиперпотребление АТ III (тромбоз, ДВС, введение гепарина);
- уменьшение синтеза (тяжелые заболевания печени, шоковые
состояния, старческий возраст…), действие эстрогенов последние месяцы беременности, прием пероральных КА
↑
- МАЛОЗНАЧИМО / дефицит витамина К, прием АНД.
Протеин С
1.
Клотинговый метод – трудоемок (по удлинению АЧТВ после
активации ПрС в стандартной плазме и в плазме пациента)…
2.
Метод с хромогенным субстратом (фотометрический) –
аналогично определению активности ферментов.
3. ИХЛ, ИФА – количество протеина С.
N = 70-130% от уровня нормальной плазмы
↓
- гиперпотребление (тромбозы, тромбофлебиты, ДВС);
- уменьшение синтеза (старческий возраст, болезни печени,
действие варфарина, длительный прием пероральных КА)
=> тромбофилия.
Другие тесты
антикоагулянтной системы
Резистентность ф.V к активному ПрС (РАПС) – по удлинению
АЧТВ при активации ПрС в смеси субстратной плазмы,
дефицитной по ПрС, с :
 плазмой пациента,
 стандартной нормальной плазмой.
Лейден-мутация (G1691A) – методом ПЦР.
Протеин S (ПрS) – кофактор ПрС; норма – 60-140% от норм.
плазмы.
При острофазовой реакции (связывание с С4-BP) возможен
недостаток ПрS и снижение активности ПрС.
Тесты тромбоцитарного звена
 Длительность кровотечения при стандартном проколе кожи
- методы Duke, Ivy, Шитиковой
 Количество тромбоцитов в крови, ТЦ формула
 Агрегация тромбоцитов (спонтанная и индуцированная
разными дозами АДФ, коллагеном, адреналином, тромбином,
ристомицином)
 Проточная цитофлуориметрия – выявление рецепторных гликопротеинов тромбоцитов (www.biocytex.fr ), Р-селектина…
Время кровотечения по Ivy
Р=40 мм рт.ст.
Референтные пределы: взрослые – 2-9 мин, дети – 3-12 мин.
from: Platelets. Second Edition (A.Michelson). Elseiver, 2007.
ЭКО-МЕД-СМ
Подсчет количества тромбоцитов
 В камере Горяева – низкая точность, возможно занижение
результатов. CV = 25-30%.
 По Фонио – в мазке крови на 1000 эритроцитов. Низкая
точность, но можно одновременно оценить морфологию
тромбоцитов.
 На гематологическом анализаторе – точно, в стандартных
условиях, быстро. Важно предотвратить агрегацию (постоянное
перемешивание). CV = 4-10% - важно для оценки динамики.
Показатели активности тромбоцитов
ИФА-тесты
1. Спонтанная и индуцированная агрегация ТЦ
(индукторы – АДФ, коллаген, адреналин,
тромбин, ристомицин)
2. PF4 – тромбоцитарный фактор 4
3. β-TG - β-тромбоглобулин
4. Метаболиты тромбоксана (11-дегидроТХA2)
Агрегация тромбоцитов
Учесть прием пациентом аспирина и НСПВ !
 На стекле / в пробирке – время образования первых ТЦ
агрегатов (просветление + зерна) при добавлении
индуктора к плазме, богатой тромбоцитами.
 На агрегометре – объективные показатели спонтанной и
индуцированной агрегации ТЦ под воздействием индукторов
разных видов и концентраций = тип кривой, ее параметры.
Типичная бифазная кривая агрегации тромбоцитов в PRP
(малые дозы индукторов)
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
Введение
индуктора
Лаг-фаза
Первичный
ответ
Вторичный ответ
(высвобождение)
o степень агрегации (в %)
o угол наклона кривой
o наличие второй волны
агрегации
Кривые агрегации тромбоцитов
Анализаторы функции тромбоцитов
POC - система
VerifyNow® Aspirin /
VerifyNow® P2Y12,
Ultegra.
POC - система
DiaMed Impact
Accumetrics / Roche
Т.В.Вавилова 2008
Активационная тромбоэластометрия
Normal
Норма
Hyperfibrinolysis
Гиперфибринолиз
Thrombocytopenia
Тромбоцитопения
Hypercoagulation
Гиперкоагуляция
Тромбоэластометры ROTEM, TEG-5000
Время исследования – 10-15 мин
Ориентировочная коагулограмма
Рекомендации Барнаульского филиала
Гематологического научного центра РАМН
Баркаган З.С., Момот А.П., 1999 г.
1. АЧТВ.
2. ПВ.
3. Уровень фибриногена в плазме.
4. РФМК (о-фенантролиновый тест).
+ количество ТЦ (на гематологическом анализаторе)
Лабораторная оценка гемостаза
Рекомендации Всероссийской Ассоциации по изучению тромбозов,
геморрагий и патологии сосудов им. А.В.Шмидта – Б.А.Кудряшова
и Российской Ассоциации медицинской лабораторной диагностики
Санкт-Петербург, 2007 г.
Оценочные тесты 1-го уровня –
лаборатории первичного звена
Количество тромбоцитов, время кровотечения,
АЧТВ, ПВ (МНО), фибриноген по Клаусу
Оценочные тесты 2-го уровня – лаборатории
диагностических центров и стационаров
Агрегация тромбоцитов, тромбиновое время,
D-димер (или РФМК), лизис эуглобулиновых фракций
Лабораторная оценка гемостаза
Дополнительные тесты –
в специализированных лабораториях
При кровоточивости
При тромбозах
Фактор Виллебранда –
активность
Антитромбин III, протеины C и S,
аРС-резистентность
Факторы свертывания –
активность
Генетический анализ – ф.V-Leiden,
мутация гена протромбина
Другие тесты - гомоцистеин,
волчаночный антикоагулянт,
антифосфолипидные антитела
Контроль антитромботической терапии –
в лабораториях всех уровней
Нефракционированный гепарин – АЧТВ
Антагонисты витамина К – МНО
Лабораторная оценка гемостаза
при кровоточивости (USA)
Внутр. путь гемостаза
АЧТВ
Внешний путь гемостаза
ПВ (с расчетом МНО)
Фибринообразование
Фибриноген, ТВ (или рептилазное время)
Активность факторов
Фибриноген, ф.II+V+VII или X (на базе ПВ),
Ф.VIII+IX+XI или XII (на базе АЧТВ), ф.XIII
Ингибиторы факторов
Микс-тесты ПВ / АЧТВ (с инкубацией),
люпус-антикоагулянт, ингибиторы ф.VIII / IX
Болезнь Виллебранда
Активность ф.VIII, vWF:RCo, vWF:Ag, кривая
ответа на ристоцетин, мультимеры vWF
Функция тромбоцитов
Агрегация ТЦ с АДФ, адреналином, тромбином,
коллагеном, арахидонатом, ристоцетином
Фибринолиз
Фибриноген, ТВ, рептилазное время,
лизис эуглобулинов, PAI-1
ДВС
D-димер (колич.), АЧТВ, ПВ, фибриноген
Волчаночн. антикоагулянт
LA-АЧТВ, dRVVT / микс-тесты с РНП и ФЛ
Лабораторная оценка гемостаза
при тромбофилии (USA)
РАПС (aPCR) *
+ мутация Лейден G1691A (ПЦР)
Люпус-антикоагулянт
LA-АЧТВ, dRVVT, микс-тесты
Антитела к кардиолипину *
IgM / IgG
Антитромбин III
Хромогенный метод, антиген АТ III
Гомоцистеин (натощак) *
Биохимический метод / ИФА
Активность ф. VIII
Клоттинговый / хромогенный метод
Активность протеина С
Хромогенный метод, антиген ПрС
Активность протеина S
Общий и свободный ПрS (антиген)
Мутация гена протромбина G20210A *
ПЦР-метод
* - селективный профиль тестов при эпизоде тромбоза, приеме АК
во время исследования или в последние 10-14 дней
Мониторинг
антикоагулянтной терапии (USA)
Варфарин
ПВ (в виде МНО)
Нефракционированный
гепарин
АЧТВ
Анти-Ха активность (хромогенный метод)
Низкомолекулярный
гепарин
Анти-Ха активность (хромогенный метод)
Прямые ингибиторы тромбина
(Агатробан, Лепирудин,
Бивалирудин)
АЧТВ
Coagulaton Testing. Quick Guide to Coagulation Testing.
Marques, MB; Fritsma, GA. AACC Press, 2006. -62p.
Развитие подходов к лабораторному
исследованию гемостаза









Генетический анализ (полиморфизм генов факторов
гемостаза, рецепторов и др.)
Проточно-цитофлуориметрические тесты (рецепторные
гликопротеины тромбоцитов)
Импедансная агрегометрия, активационная тромбоэластометрия
Доказательные иммунохимические тесты (отдельные
факторы системы гемостаза, маркеры тромбофилии – D-димер,
Т-АТ, F1+2, PAI-1, …)
Сложные коагулометрические тесты
Индуцированная агрегация тромбоцитов (АДФ / коллаген /
адреналин / ристомицин…)
Инструментальные методы (механическая / оптическая
коагулометрия, тромбоэластография)
Коагулограмма (АЧТВ, ПВ, фибриноген…), РФМК, ПДФ
Свертывание цельной крови
модиф. по Сушкевич Г.Н., 2009
Спасибо
за внимание!