44 ПроГеСТерон В ПЛаЦенТе При БереМенноСТи
реклама
44 ▪ медицинские науки ▪ УДК 612.63.031.3:618.36:616.523-036.11 ПРОГЕСТЕРОН В ПЛАЦЕНТЕ ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ, ОСЛОЖНЕННОЙ ОБОСТРЕНИЕМ ГЕРПЕС-ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ И.В. Довжикова Учреждение СО РАМН «Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания СО РАМН», г. Благовещенск cfpd@amur.ru При гистохимическом исследовании ворсинчатых хорионов и зрелых плацент от беременных, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции, обнаружено снижение интенсивности работы 3β-гидроксистероиддегидрогеназы, отвечающей за синтез прогестерона в плаценте, и 3α-гироксистероиддегидрогеназы, инактивирующей данный гормон. Нарушение процессов гормонообразования прямо отразилось на содержании прогестерона в гомогенате ворсинчатых хорионов и плаценты. Ключевые слова: прогестерон, плацента, герпес, 3β-гидроксистероиддегидрогеназа, 3α-гироксистероиддегидрогеназа. PROGESTERONE IN PLACENTA AT PREGNANCY, COMPLICATED BY HERPES-VIRUS INFECTION EXACERBATION I.V. Dovzhikova FarEeastern Scientific Center of Respiratory Physiology and Pathology Siberian Branch RAMN, Blagoveschensk, Russia cfpd@amur.ru At histochemical study of villous chorions and term placentas from pregnant women with herpetic infection exacerbation it was found that 3β-hydroxysteroid dehydrogenase activity and 3α-hydroxysteroid dehydrogenase activity are decreased. Disturbance of steroid hormone synthesis has an effect on progesterone concentration in placental and villous chorion homogenate. Keywords: progesterone, placenta, herpes, 3β-hydroxysteroid dehydrogenase, 3αhydroxysteroid dehydrogenase. В последние годы была признана роль сопровождаемая гормональным дисбалан- герпес-вирусной инфекции в развитии раз- сом. Мы считаем, что необходимо не только личной акушерской и перинатальной пато- зарегистрировать происходящие изменения, логии. При ее обострении у женщин форми- но и раскрыть патогенез развивающейся па- руется фетоплацентарная недостаточность, тологии. фундаментальные исследования №4, 2010 45 ▪ медицинские науки ▪ Важнейшим гормоном, подготавливаю- и лабораторно диагностированного обо- щим организм к беременности и обеспе- стрения герпес-вирусной инфекции. По зна- чивающим ее нормальное течение, явля- чимым параметрам (возраст, акушерско- ется прогестерон. Он оказывает защитное гинекологический анамнез, наличие других действие на оплодотворенную яйцеклетку хронических соматических заболеваний) и матку, поскольку снижает активность на момент нервно-мышечного аппарата матки. Проге- группы достоверно не различались. обследования сравниваемые стерон способствует росту матки при бере- Диагностику герпес-вирусной инфекции менности, развитию железистой ткани мо- осуществляли путем определения антител лочных желез, поддерживает в центральной класса М и G к вирусу простого герпеса 1 нервной системе доминанту беременности, иммуноферментным методом с помощью стимулирует синтез стероидных гормонов, стандартных оказывает иммунодепрессивное действие, Бест» (Новосибирск) на аппарате спек- подавляя реакцию отторжения плодного трофотометр «Stat-Fax 2100» (USA). Ис- яйца [1, 6, 7]. следование прогестерона в плацентарном тест-систем ЗАО «Вектор- Синтез прогестерона во время гравидар- гомогенате проводили методом иммуно- ного периода осуществляется плацентой. ферментного анализа, используя наборы Постепенно, с 5-й недели внутриутробного ЗАО «Алкор Био» (Санкт-Петербург, Рос- развития она становится основным постав- сия), на спектрофотометре «Stat-Fax 2100» щиком гормона. Прогестерон синтезируется (США). из холестерина. Ферментом, обеспечиваю- Плаценту забирали в течение щим его необходимую концентрацию, яв- 10– 15 мин. после родов. Ее поверхность от- ляется мывали большим количеством физиологи- I типа. данный 3β-гидроксистероиддегидрогеназа Энзимом, гормон, инактивирующим считается 3α-гидро­ ксистероиддегидрогеназа II типа [8, 10]. ческого раствора (ФР). Плодовая часть плаценты срезалась скальпелем пластинками площадью до 2–3 см, толщина срезаемого Целью нашей работы был анализ нару- слоя не превышала 1 мм. Кусочки ткани от- шений метаболизма прогестерона при бе- мывали от клеток крови в 200 мл ФР, пере- ременности, мешивая 15 мин на магнитной мешалке. осложненной обострением Для получения экстрактов кусочки плацен- герпес-вирусной инфекции. Материалы и методы исследования ты взвешивали, растирали и гомогенизиро- Материалом послу- вали до однородной кремообразной массы. жили 38 образцов ворсинчатого хориона, К полученному гомогенату добавляли ФР в взятого при проведении медицинских абор- объеме, равном изначальному весу ткани тов на сроке 5-10 недель беременности, (на 1 г — 1 мл ФР). Взвесь помещали в пла- и 35 зрелых плацент, полученных во время стиковые пробирки Falcon и подвергали за- родов, от практически здоровых женщин, мораживанию при -20ºС в течение суток. которые составили контрольную группу, Размороженный и беременных с признаками клинического ровали при 4000 об/мин при температуре для исследования гомогенат центрифуги- фундаментальные исследования №4, 2010 46 ▪ медицинские науки ▪ +4ºС. Надосадочную жидкость использова- вития; 1,63± 0,098 усл. ед. при сроке 7–8 не- ли для проведения ИФА. дель; 1,97± 0,078 усл. ед. при 9–10 недель- Выявление 3β-гидроксистероиддегидро­ ной стадии и 4,68± 0,067 усл. ед. в зрелой геназы и 3α-гидроксистероиддегидрогеназы плаценте. Таким образом, активация герпес- производилось по методу З. Лойда [4]. Ко- вирусного процесса оказала воздействие личество образующихся продуктов реакции на интенсивность работы фермента, синте- проводили путем подсчета на программе зирующего прогестерон в плаценте. компьютерной цитофотометрии методом из- Мы изучили содержание данного гормона мерения на стандартную единицу площади в гомогенате ворсинчатых хорионов и пла- 0,1 (зонд) в 100 различных точках объекта. цент. Плацента сама синтезирует гормоны, Результаты исследования и обсуждение 3β-гидроксистероиддегидрогеназа явля- поэтому такая оценка позволит лучше отразить процессы синтеза, секреции и превращения гормонов, происходящие в ней. ется одним из ключевых ферментов гормо- При физиологически протекающей нообразования. С помощью гистохимиче- гестации ской реакции было обнаружено, что энзим, на который на основании субстратной спец- нмоль/мл ифичности мы отнесли к I типу, хорошо 160,0±21,13 нмоль/мл при сроке 7–8 не- выявлялся в синцитио- и цитотрофобласте дель, хориальных ворсин начиная с 5–6 неде- 9–10 недель и до 240,5±9,05 нмоль/ мл взре- ли гестации. Цитофотометрически его со- лой плаценте (38-40 недель). При обостре- держание составило 2,33 ± 0,067 усл. ед. нии герпес-вирусной инфекции во время По мере увеличения срока интенсивность беременности содержание данного гормона гистохимической реакции, выявляющей 3β- в гомогенате ворсинчатого хориона резко гидроксистероиддегидрогеназу, возрастала, изменялось. Так, при сроке развития 5-6 не- но гистотопография ее не менялась. Цито- дель количество прогестерона уменьшилось фотометрический показатель увеличился до 23,4±5,71 нмоль/мл (р<0,001), при сроке при беременности 7-8 недель до 3,56±0,113 7-8 недель — до 32,9±4,11нмоль/мл (р<0,01), усл. ед. и до 4,90 ± 0,091 усл. ед. при 9-10 при сроке 9-10 недель — до 48,3±4,33 недельной стадии развития; в зрелой пла- нмоль/мл (р<0,001), в зрелой плаценте — центе 39-40 недель гестации достиг 7,23 ± до 183,9±7,18 нмоль/мл (р<0,05). Это созда- 0,098 усл. ед. вало большую опасность для беременности концентрация линейно возрастало при сроке 5–6 прогестерос 152,2±38,92 недель до 171,2±22,16 нмоль/мл до при сроке Активность 3β-гидроксистероиддегидро­ ввиду того, что достаточный уровень про- геназы в плацентарных и хориальных вор- гестерона необходим для сохранения ге- синах от женщин, перенесших обострение стации. Продукция прогестерона, особенно герпес-вирусной инфекции во время бере- в начале гестации, настолько важна, что ее менности, была резко снижена. Цитофото- недостаток часто приводит к десинхрониза- метрически она оценивалась равной 1,08 ± ции развития эндометрия и является в боль- 0,034 усл. ед. при 5-6 недельной стадии раз- шинстве случаев основной причиной пре- фундаментальные исследования №4, 2010 ▪ медицинские науки ▪ 47 ждевременного прерывания беременности давление активности фермента под влияни- [2, 3, 5, 6, 9]. ем инфекционного процесса. Причиной уменьшения количества про- Заключение гестерона при осложненной герпесом бере- В результате исследований обнаружено, менности, по нашему мнению, стало сниже- что герпес-вирусная инфекция отрицательно ние активности стероидогенеза в плаценте. влияет на интенсивность процессов обмена В ме прогестероновом задействована метаболиз- прогестерона в плаценте, снижая активность и 3α-гироксистеро­ работы энзимов, обеспечивающих как син- иддегидрогеназа, преобразующая гидрок- тез, так и его инактивацию в данном органе. сильные группы стероида и тем самым Выявленное нарушение прямо отразилось участвующая в регуляции его активности на содержании прогестерона в плаценте, [8]. Локализация энзима хорошо выявля- который оказывает влияние на метаболизм лась в синцитиотрофобласте и цитотрофо- в организме беременной, создает условия бласте ворсин. Цитофотометрически его со- для физиологического роста и развития пло- держание в контрольной группе составило да, а также процесса родовой деятельности. 3,26±0,233 усл. ед. на стадии 5-6 недель раз- Признано, что изменение его уровня при- вития. По мере развития беременности водит к развитию угрозы прерывания бере- интенсивность гистохимической реакции менности. Поэтому уменьшение количества возрастала до 3,75±0,572 усл. ед. на стадии гормона негативно отражается на гравидар- 7-8 недель; до 4,01±0,676 усл.ед. на стадии ном гомеостазе. 9-10 недель и до 4,99±0,343 усл.ед. в зрелой Список литературы плаценте (38-40 недель). Гистотопография 1. Богданович Р.Н., Берестовая Т.А., Лу- фермента оставалась прежней. Выявленный кьянов П.А. Значение определения гормо- факт свидетельствовал о росте активности нов фетоплацентарной системы и трофобла- энзима, что объяснялось увеличением об- стического β1-гликопротеина у беременных мена стероидных гормонов во время геста- с угрозой невынашивания для диагности- ции. ки плацентарной недостаточности // Рос- Анализ ворсинчатых хорионов от женщин, перенесших обострение герпес-вирусной сийский вестник акушера-гинеколога. — 2005. — Т. 5, № 6. — С. 3–7. инфекции во время беременности, показал 2. Гаспарян Н. Д., Карева Е. Н. Современ- уменьшение продукта гистохимической ре- ные представления о механизме регуляции акции на 3α-гидроксистероиддегидрогеназу сократительной деятельности матки // Рос- в синцитиотрофобласте и цитотрофобласте. сийский вестник акушера-гинеколога. — Цитофотометрически его содержание сни- 2003. — №2. — URL: http://www.mediasphera. зилось до 1,41±0,213 усл. ед. на сроке 5-6 ru/journals/akuvest/detail/271/4111/ (дата об- недель гестации; до 1,89 ± 0,347 усл. ед. ращения: 29.09.09). на сроке 7-8 недель; до 2,33±0,675 усл. ед. 3. Некоторые аспекты этиологии и пато- на сроке 9-10 недель и до 2,67±0,233 усл. генеза эмбриональных потерь в I триместре ед. в зрелой плаценте, что указывало на по- гестации / Ю.Э. Доброхотова, Р.И. Озерова, фундаментальные исследования №4, 2010 48 ▪ медицинские науки ▪ Ж.А. Мандрыкина и др. // Российский вест- 11. Bogdanovich R.N., Berestovaya T.A., ник акушера-гинеколога. — 2008. — № 5. — Lukyanov P.A. Significance of measurements С. 15–18. of fetoplacental 4. Лойда З., Госсрау Р., Шиблер Т. Гисто- hormones and trophoblas- tic β1–glycoprotein in pregnant females with химия ферментов. Лабораторные методы. — threatening М.: Мир, 1982. — 259 с. of placental insufficiency // Rossiysky vestnik 5. Пустотина О.А. Плацентарная недостаточность и угроза прерывания беремен- miscarriage for the diagnosis akushera-ginekologa. — 2005. — V. 5, № 6. — P. 3–7. ности — обоснование применения препа- 12. Gasparyan N.D. Kareva E.N. Modern ратов прогестерона // Российский вестник notions about regulation mechanism contrac- акушера-гинеколога. — 2006. — № 2. — tile activity of the uterus // Rossiysky vestnik С. 51-54. akushera-ginekologa. — 2003. — №2. — URL: 6. Свирская Е.В. Гестагены при беременности// 9 месяцев — 2008. — № 3. — URL: http://www.ginecolog.by/statya.php?st=83 (дата обращения: 21.04.09). http://www.mediasphera.ru/journals/akuvest/ detail/271/4111/ (дата обращения: 29.09.09). 13. Some aspect of the etiology and pathogenesis of embryonic depletions in the first tri- 7. Шмагель К.В., Черешнев В.А. Сте- mester of gestation / Yu. E. Dobrochotova, R.I. роидные гормоны: физиологическая роль Ozerova, Zh.A. Mandrykina [et. al.] // Rossi- и диагностическое значение в период бере- ysky vestnik akushera-ginekologa. — 2008. — менности // Успехи физиол. наук. — 2004. — № 5. — P. 15–18. Т. 35. — № 3. — С. 61 — 71. 8. Human 3α-hydroxysteroid dehydrogenase isoforms (AKR1C1-AKR1C4) of the aldo-keto 14. Lojda Z., Gossrau R., Schiebler T.H. Enzyme Histochemistry. A Laboratory manual. — М.: Mir, 1982. — 259 p. reductase superfamily: functional plasticity 15. Pustotina O.A. Placental insufficiency and tissue distribution reveals roles in the in- and treat of pregnancy loss-arguments for use activation and formation of male and female of progesterone drugs // Rossiysky vestnik sex hormones / T.M. Penning, M.E. Burczyn- akushera-ginekologa. — 2006. — № 2. — ski, J.M. Jez [et al.] // Biochem. J. — 2000. — P. 51–54. Vol. 351. — P. 67–77. 9. Methotrexate treatment of unruptured 16. Svirskaya. Hestagen at pregnancy // 9 months — 2008. — № 3. — URL: http:// ectopic pregnancy: A report of 100 cases / www.ginecolog.by/statya.php?st=83 T.G. Stovall, F.W. Ling, L.A. Gray [et al.] // обращения: 21.04.09). Obstet. Gynecol. — 1991. — Vol. 77. — Р. 749–753. (дата 17. Shmagel К.V. Chereshnev V.А. Steroid hormones: physiological role and diagnostic 10. Strauss J.F., Martinez F., Kiriakidou M. importance at period of pregnancy // Uspekhi Placental steroid hormone synthesis: unique fiziologicheskikh nauk. — 2004. — V. 35, features and unanswered questions // Biol- № 3. — P. 61–71. ogy of reproduction. — 1996. — V. 54. — P. 303– 311. фундаментальные исследования №4, 2010 18. Human 3α-hydroxysteroid dehydrogenase isoforms (AKR1C1-AKR1C4) of the al- ▪ медицинские науки ▪ 49 do-keto reductase superfamily: functional plas- T.G. Stovall, F.W. Ling, L.A. Gray [et al.] // ticity and tissue distribution reveals roles in the Obstet. Gynecol. — 1991. — Vol. 77. — inactivation and formation of male and female Р. 749– 753. sex hormones / T.M. Penning, M.E. Burczyn- 20. Strauss J.F., Martinez F., Kiriakidou M. ski, J.M. Jez [et al.] // Biochem. J. — 2000. — Placental steroid hormone synthesis: unique Vol. 351. — P. 67-77. features and unanswered questions // Biol- 19. Methotrexate treatment of unruptured ectopic pregnancy: A report of 100 cases / ogy of reproduction. — 1996. — Vol. 54. — P. 303– 311. фундаментальные исследования №4, 2010
