ÁÞËËÅÒÅÍÜ ÂÑÍÖ ÑÎ ÐÀÌÍ, 2011, ¹ 1 (77), ×àñòü 2 УДК 615.32:591.44 И.К. Иванова, Л.Н. Шантанова, И.М. Бальхаев, К.С. Лоншакова ВЛИЯНИЕ ФИТОАДАПТОГЕНА «ПОЛИФИТОТОН» НА СТРУКТУРУ НАДПОЧЕЧНИКОВ БЕЛЫХ КРЫС ПРИ ИММОБИЛИЗАЦИОННОМ СТРЕССЕ Бурятский государственный университет (Улан-Удэ) В статье представлены результаты изучения влияния фитоадаптогена «Полифитотона» на структуру надпочечников белых крыс при иммобилизационом стрессе. Ключевые слова: «Полифитотон», иммобилизационный стресс, надпочечники THE EFFECTS OF PHYTOADAPTOGENE «POLYPHYTOTON» ON THE STRUCTURE OF WHITE RAT’S ADRENAL BY IMMOBILIZATIVE STRESS I.K. Ivanova, L.N. Shantanova, I.M. Balkhayev, K.S. Lonshakova Buryat State University, Ulan-Ude The article presents the results of studying effect of phytoadaptogene «Polyphytoton» on the structure of adrenal glands of white rats during immobilizative stress. Key words: “polyphytoton”, immobilizativ e stress, adrenals �бщеизвестно значение эндокринной системы для поддержания гомеостаза в различных условиях внешней среды при различных патологических процессах, протекающих в организме [4]. Надпочечники являются одним из ведущих звеньев гипоталамогипофизарно-адренокортикальной системы (ГГАС), отвечающей за поддержание гомеостаза организма и играющей важную роль в адаптации организма к изменениям среды. Исследование микростроения надпочечников белых крыс при иммобилизационном стрессе разной экспозиции дает возможность проследить за изменениями, происходящими в этом органе в результате сильных внешних воздействий, а также влияние на них испытуемого фитосредства «Полифитотон» (аир болотный, бадан толстолистный, боярышник, девясил высокий, имбирь аптечный, календула лекарственная, кардамон настоящий, крапива двудомная, левзея сафлоровидная, мускатный орех, облепиха крушиновидная, перец черный, петрушка кудрявая, родиола розовая, солодка голая и шиповник). МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ �пыты проведены на крысах линии Вистар массой 180–200 г. Модель иммобилизационного стресса воспроизводили общепринятым методом путем фиксации животных в положении лежа на спине в течение 6, 12 и 24 ч [6]. «Полифитотон» вводили внутрижелудочно в объеме 3,0 мл/кг многократно в течение 7 дней 1 раз в день за 1 ч до приема пищи. Животным контрольной группы вводили в эквивалентном объеме дистиллированную воду по аналогичной схеме. На 8-е сутки эксперимента крыс подвергали иммобилизационному стрессу, после чего животных декапитировали под легким эфирным наркозом. Правый надпочечник фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина. Депарафинированные гистологические срезы органа для оценки морфологической картины окра142 шивали по общепринятой методике гематоксилинэозином [1, 3]. В замороженных срезах органов, полученных на микротом-криостате МК-25, выявляли содержание нейтральных жиров суданом черным «В» по �еренбауму. �б угнетающем действии иммобилизационного стресса судили по результатам гистологического исследования структуры надпочечника. Достоверность различий оценивали с помощью t-критерия Стьюдента. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ При микроскопическом исследовании надпочечников крыс, подвергнутых 6-часовому иммобилизационному стрессу, обнаружили полнокровие всех звеньев кровеносного русла, особенно резко выраженное в клубочковой зоне. Вокруг мелких артерий и капилляров наблюдали мелкие диапедезные кровоизлияния. В капсуле, покрывающей клубочковый слой, наблюдали разрыхление ее с плазматическим пропитыванием и набуханием. Кроме того, отмечали выраженные изменения архитектоники клеток клубочковой зоны. Клетки дискомплексированы, расположены беспорядочно, тогда как в норме они образуют гроздевидные образования. Ядра клеток вместо овально-круглой формы принимали угловатый ориентир, выражен был полиморфизм клеток. В пучковой зоне выявлялись дистрофические изменения, вакуолизация и дискомплексация клеток. Сетчатая зона имела компактное строение, с явлениями выраженного полнокровия, отека разной степени. Результаты морфометрического анализа показали, что ширина пучковой зоны под влиянием 6-часового иммобилизационного стресса увеличилась на 13 % по сравнению с нормой (табл. 1). Как видно из таблицы 1, в изменениях, происходящих при 6-часовой иммобилизации животных, обращает на себя внимание гипертрофия клеток пучковой зоны. При оценке морфологических Ýêñïåðèìåíòàëüíûå èññëåäîâàíèÿ â áèîëîãèè è ìåäèöèíå ÁÞËËÅÒÅÍÜ ÂÑÍÖ ÑÎ ÐÀÌÍ, 2011, ¹ 1 (77), ×àñòü 2 Таблица 1 Влияние 6-часового иммобилизационного стресса на морфометрические параметры коры надпочечников белых крыс и при их коррекции фитосредством «Полифитотон» , n ( 1( + 2 + , , 10 38,6 ± 2,4 354,5 ± 15,3 228,6 ± 10,5 ) 9 40,2 ± 2,9 400,9 ± 21,2* 234,3 ± 17,8 ) 10 39,0 ± 1,9 362,6 ± 12,9 231,7 ± 15,4 Примечание: * (здесь и далее) – значения достоверны по сравнению с данными у животных интактной группы при p ≤ 0,05; ** – значения достоверны по сравнению с данными у животных контрольной группы при p ≤ 0,05. делялся в виде мелких гранул, неравномерно распределенных в цитоплазме клеток. В то же время, окраска суданом черным выявляла большое количество суданофильных включений в клетках пучковой и сетчатой зон. При 24-часовом иммобилизационном стрессе в надпочечниках крыс наблюдали дальнейшую гипертрофию корковой зоны. Границы перехода одной зоны в другую становятся трудно различимыми. При этом ширина пучковой и сетчатой зон увеличилась соответственно в среднем на 30 и 23 % по сравнению с таковыми в контрольной группе животных (табл. 3) В пучковой и сетчатой зонах наряду с дистрофическими изменениями наблюдалась картина, характерная для стресс-реакции, главным образом в виде очагового или полного исчезновения липидов. В пучковой зоне сохранялись небольшие тяжи с мелкокапельной и пылевидной концентрацией жировых включений. Морфология сетчатой зоны при 24-часовом иммобилизационном стрессе отличалась выраженной разреженностью клеток. Среди них одни клетки содержали небольшое темное ядро и ацидофильную цитоплазму, что свидетельствует, повидимому, о дегенерации клеток. У других ядро и цитоплазма выглядели более светлыми. Некоторые клетки этой зоны содержали пигмент липофусцин. Клетки мозгового слоя образуют как бы гроздья и критериев состояния функциональной активности коры степень насыщения коры надпочечников липидами имеет существенное значение. Результаты изучения изменений коры, а также заполнения ее клеток липидами, показали, что 6-часовой иммобилизационный стресс приводит к обеднению коры надпочечников липидами. При 12-часовом иммобилизационном стрессе гипертрофии подвергались пучковая и сетчатая зоны коры надпочечника, о чем свидетельствует увеличение этих зон соответственно на 20 и 17 % по сравнению с показателями интактной группы животных (табл. 2). Гипертрофия, в основном, осуществлялась за счет усиления кровенаполнения, отека и увеличения паренхиматозной массы коркового вещества. В пучковой зоне в результате отечных явлений и резкого расширения кровеносных капилляров возникала дискомплексация рядов клеток. В сетчатой зоне кровеносные капилляры формировали крупные магистральные капилляры. Сгущение капиллярной решетки в сетчатой зоне можно отнести на счет увеличения связи капилляров этого участка с пучковой зоной и мозговым веществом. �краска срезов надпочечников на жиры выявляла во всех сериях опытов однотипную картину, свидетельствовавшую о значительном снижении содержания липидов в результате стрессорного воздействия. При 12-часовом стрессе жир опре- Таблица 2 Влияние 12-часового иммобилизационного стресса на морфометрические параметры коры надпочечников белых крыс и при их коррекции фитосредством «Полифитотон» , n ( 1( + 2 + , , 10 38,6 ± 2,4 354,5 ± 15,3 228,6 ± 10,5 ) 8 41,2 ± 2,2 420,6 ± 20,6* 280,4 ± 14,4* ) 9 39,0 ± 3,0 390,0 ± 17,3** 239,6 ± 18,6** Таблица 3 Влияние 24-часового иммобилизационного стресса на морфометрические параметры коры надпочечников белых крыс и при их коррекции фитосредством «Полифитотон» , , , 38,6 ± 2,4 354,5 ± 15,3 228,6 ± 10,5 n 10 ( 1( + + 2 ) 9 42,0 ± 2,1 460,7 ± 18,6* 282,0 ± 17,5* ) 9 39,6 ± 1,6 418,0 ± 16,3** 243,0 ± 13,4** Ýêñïåðèìåíòàëüíûå èññëåäîâàíèÿ â áèîëîãèè è ìåäèöèíå 143 ÁÞËËÅÒÅÍÜ ÂÑÍÖ ÑÎ ÐÀÌÍ, 2011, ¹ 1 (77), ×àñòü 2 неправильной формы тяжи, располагаясь вокруг кровеносных сосудов. При 24-часовом стрессорном воздействии наблюдались группы клеток с дистрофическими изменениями, некробиозами. Часто капилляры сливались между собой в результате нарушения стенок, образуя диапедезные кровоизлияния. ВЫВОДЫ Центральное место в изменениях, происходящих при остром стрессе на структурном уровне, занимает гипертрофия надпочечников, которая осуществляется за счет усиления кровенаполнения и увеличения паренхиматозной массы коркового вещества [5]. Результаты проведенных исследований свидетельствуют о том, что под влиянием 6, 12 и 24-часового иммобилизационного стресса происходит гипертрофия надпочечников, при этом изменения, происходящие в надпочечниках, коррелируют по выраженности с продолжительностью стрессорного воздействия. Гипертрофия осуществлялась преимущественно за счет клеток пучковой зоны, что подтверждается литературными данными [2]. Кроме того, наши исследования показали, что во время стресса происходит истощение липидного состава надпочечников во всех зонах, что, по мнению ряда авторов, свидетельствует об угнетении функциональной активности надпочечников в острую фазу стресса [2]. �аким образом, при сравнительно непродолжительном стрессорном воздействии (6, 12 и 24 часа) наблюдали изменения паренхимы надпочечников у крыс. Структурные нарушения сопровождались дистрофическими изменениями и дискомплексацией, обеднением клеток коры липидами. Введение растительного средства «Полифитотон» не вызывало выраженных структурных изменений в зонах коры, а явления полнокровия и умеренной липидной насыщенности свидетельствовали о сохранившихся функциях этой зоны. ЛИТЕРАТУРА 1. Елисеев В.Г., Субботин М.Я., Афанасьев Ю.И., Котовский Е.Ф. �сновы гистологии и гистологической техники. – М., 1967. – 268 с. 2. Кириллов �.И. Стрессовая гипертрофия надпочечников. – М.: Наука, 1994. – 175 с. 3. Меркулов Г.А. Курс патологогистологической техники. – Л., 1969. – 423 с. 4. Савина Р.И. Морфология и функция надпочечников при некоторых важнейших видах патологии человека. – Душанбе: Дониш, 1976. – 168 с. 5. Селье Г. �черки об адаптационном синдроме. – М.: Медицина, 1960. – 254 с. 6. Юматов Е.А., Скоцеляс Ю.Г. Сравнительный анализ устойчивости функций сердечно-сосудистой системы у крыс разных линий при иммобилизации // Журн. высшей нервн. деят. – 1979. – № 2. – С. 345–350. Сведения об авторах Бальхаев Илларион Митрофанович – к.м.н., доцент кафедры фармакологии и традиционной медицины медицинского факультета БГУ (670002, г. Улан-Удэ, ул. Октябрьская, 36а; тел.: (3012) 44-82-55; e-mail: ill.balkhaev@mail.ru). Иванова Инна Константиновна – к.б.н., ст. преподаватель каф. анатомии и физиологии медицинского факультета БГУ. Лоншакова Клара Сергеевна – д.б.н., профессор кафедры анатомии и физиологии медицинского факультета БГУ. Шантанова Лариса Николаевна – д.б.н., профессор, зав. лабораторией безопасности биологически активных веществ ИОЭБ СО РАН. 144 Ýêñïåðèìåíòàëüíûå èññëåäîâàíèÿ â áèîëîãèè è ìåäèöèíå