ISSN 1812-9498. ВЕСТНИК АГТУ. 2008. № 3 (44) УДК 639.371.1. 07 Ю. Н. Грозеску, А. А. Бахарева ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ДЛЯ ОТБОРА РЫБОВОДНО-ПРОДУКТИВНЫХ САМОК И САМЦОВ ОСЕТРОВЫХ РЫБ Введение Катастрофическое сокращение численности популяций осетровых рыб привело к проблеме обеспечения рыбоводных заводов качественными рыбоводно-продуктивными производителями. Ухудшение экологических условий в Волго-Каспийском бассейне является основной причиной негативного изменения физиологического состояния осетровых рыб. Одним из наиболее опасных последствий этих изменений являются паталогии в гонадо- и гаметогенезе, что отражается на качестве половых продуктов и, как следствие, приводит к снижению жизнестойкости молоди. В настоящее время трудности с заготовкой производителей, возникшие на осетровых рыбоводных заводах, привели к удлинению сроков их отлова и вынужденному использованию в рыбоводном процессе рыб в ослабленном состоянии, не подготовленных к восприятию гормональных инъекций. В связи с этим выходом из сложившейся ситуации становится создание на заводах рыбоводно-продуктивных маточных стад. Формирование маточных стад проводят по двум направлениям: формирование ремонтно-маточных стад от икры и формирование стада из отловленных зрелых и незрелых производителей с дальнейшей доместикацией «диких» особей. При доместикации «диких» зрелых производителей и вовлечении их в процесс формирования маточного стада необходимо учитывать сложившуюся эволюционно-генетическую структуру популяции – наличие озимых и яровых рас, т. к. искусственное воспроизводство подразумевает не только поддержание численности, но и сохранение всех существующих природных форм. Таким образом, в сложившихся условиях для повышения эффективности искусственного воспроизводства осетровых рыб на рыбоводных предприятиях отбор производителей в маточное стадо должен проводиться на основании сведений об их физиологическом состоянии. Материал и методика проведения исследований Исследовательские работы проводили на осетровом рыбоводном заводе «Лебяжий» в Астраханской области в 2006–2007 гг. В качестве объектов исследований использовали производителей озимой и яровой рас русского осетра, отловленных из естественной популяции. Кровь у производителей отбирали из жаберной артерии. Гематологические исследования проводили по единым отработанным методикам: концентрацию гемоглобина (Hb) определяли гемиглобинцианидным методом с использованием фотоколориметра; концентрацию эритроцитов (Er) – с использованием электронного прибора Piсoscale PS-4; общий сывороточный белок крови (ОБС) – рефрактометрически; общий объем эритроцитов (гематокритную величину Ht) – с использованием микроцентрифуги [1]. Морфологическую картину крови оценивали по мазкам, которые обрабатывали под микроскопом. Мазки фиксировали и окрашивали по Паппенгейму. Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) определяли унифицированным микрометодом Панченкова. Результаты подвергали статистическому анализу [2]. Результаты исследований и их обсуждение Одним из наиболее доступных методов контроля физиологических показателей является анализ крови. Все изменения, происходящие в организме, отражаются на гематологических показателях. Исследование крови дает достаточно ясную картину даже на самых ранних этапах различных заболеваний, а также при изменениях условий обитания рыб [3]. Правильная и своевременная диагностика изменений картины крови позволяет выявить возникающий дисбаланс или патологию в организме рыб, поэтому для оценки физиологического состояния производителей необходимо проводить комплексное гематологическое исследование. Уровень гемоглобина у яровых самок был ниже, чем у озимых на 6 %, у самцов – на 10 %. Достаточно низкие показатели уровня гемоглобина обусловлены биологическими особенностями осетровых рыб, у которых этот показатель снижается во время нереста [4]. Кроме того, 18 РЫБНОЕ ХОЗЯЙСТВО выдерживание рыб при нерестовых температурах в искусственных условиях также снижает уровень гемоглобина в крови [5]. Вероятно, большая выраженность анемии у яровых производителей связана с тем, что они, по сравнению с озимыми, в меньшей степени адаптировались к искусственным условиям содержания. Общий объем эритроцитов (гематокритная величина) был достаточно стабильным в каждой группе рыб (Cv < 2 %). Этот показатель у озимых производителей был выше в среднем на 8–10 %. Количество эритроцитов как у самок, так и у самцов находилось примерно на одинаковом уровне – 0,53–0,63 млн/мм3. Этот показатель был незначительно выше у озимых производителей. Рефрактерные самки и самцы русского осетра отличались низким уровнем гемоглобина в крови – 35–40 г/л и более высокими показателями СОЭ, что является характерным признаком при частичной резорбции икры [6, 7]. По остальным показателям они не отличались от рыбоводно-продуктивных самок той же биологической группы. Самки русского осетра каждой биологической группы, отдавшие икру с уровнем оплодотворения выше 85 %, статистически не различались между собой по содержанию в крови и β-липопротеидов. Вместе с тем отмечалась тенденция к повышению содержания этих веществ в сыворотке крови самцов и самок озимой расы (рис. 1). 30 25 20 Самки г/л 15 Самцы 10 5 0 1 2 Рис. 1. Содержание ОСБ в крови производителей русского осетра: 1 – озимые; 2 – яровые У озимых форм часть речного периода занимает зимовка. От того, в каких условиях и, соответственно, в каком функциональном состоянии находятся производители, зависят в конечном счете и результаты размножения. Относительно благополучный период собственно зимовки сменяется резким ухудшением состояния в весеннее время [8]. С марта по май снижается количество ОСБ, причем у самцов снижение выражено в большей степени [9]. Следует отметить, что снижение в крови яровых самок осетра ОСБ не привело к снижению показателей оплодотворения. В. И. Лукьяненко с соавторами [7] отмечали, что у самок с различной степенью дегенерации икры концентрация выше, чем у рыбоводно-продуктивных. Так, у самок и самцов обеих биологических групп, не отреагировавших на гипофизарную инъекцию, этот показатель был значительно выше – 5,4 ± 1,1 г/л у самок и 3,5 ± 1,7 г/л у – самцов. Уровень β-липопротеидов у русского осетра в процессе доразвития и созревания половых продуктов претерпевает сложные изменения [10]. У рыбоводно-продуктивных самок русского осетра уровень β-липопротеидов достоверно не различался, этот показатель был выше у рыб, не ответивших на гормональную стимуляцию (рис. 2). 19 ISSN 1812-9498. ВЕСТНИК АГТУ. 2008. № 3 (44) мг% 700 600 500 400 300 200 100 0 Озимые Яровые Рефрактерные Рис. 2. Концентрация β-липопротеидов в сыворотке крови самок русского осетра Икра, полученная от самок русского осетра озимой расы, отличалась более высокими показателями оплодотворения. Сперма озимых самцов была лучше по основным качественным показателям (подвижность по шкале Персова, время активности, сперматокрит). Выводы 1. У рыбоводно-продуктивных самок и самцов русского осетра озимой расы отмечали увеличение уровня гемоглобина в крови на 6 и 10 % соответственно, гематокритной величины – на 8–10 % по сравнению с яровыми. 2. Уровень β-липопротеидов в крови у самцов озимой расы, положительно отреагировавших на гормональную стимуляцию, был выше на 28 %, у самок – лишь на 4 %. 3. Производители русского осетра, не отреагировавшие на гормональную стимуляцию, характеризовались низким содержанием в крови гемоглобина, повышенной СОЭ, а также более высоким уровнем ОСБ, β-липопротеидов. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ Справочник по клиническим лабораторным методам исследования / Под ред. Е. А. Кост. – М.: Медицина, 1975. – С. 17. 2. Лакин Г. Ф. Биометрия. – М.: Высш. шк., 1990. – 293 с. 3. Бекина Е. Н., Нефедова И. В. Физиолого-биохимические показатели сибирского осетра обской популяции в условиях зимнего содержания // Тепловодная аквакультура и биологическая продуктивность водоемов аридного климата, Астрахань, 16–18 апреля 2007 г.: Материалы и докл. Междунар. симпоз. – Астрахань: Изд-во АГТУ, 2007. – С. 431–432. 4. Андреев В. В. Содержание микроэлементов и показателей крови у волжской нерестовой популяции белуги // Тр. Астрахан. техн. ин-та рыбной пром-сти и хоз-ва. Юбилейный вып. – Астрахань, 1980. – С. 103–107. 5. Карзинкин Т. С., Коржуев П. А., Строганов Н. С. Изучение обмена веществ у рыб в свете решения рыбохозяйственных задач // Обмен веществ и биохимия рыб. – М.: Наука, 1967. – С. 5–12. 6. Андреев В. В. Некоторые особенности минерального обмена у белуги в речной период жизни // Экологическая физиология и биохимия рыб: Тез. докл. IV Всесоюз. конф. – Астрахань, 1979. – Т. 2. – С. 79. 7. Лукьяненко В. И., Дубинин В. И., Сухопаров А. Д. Вляние экстремальных условий приплотиной зоны реки на осетровых рыб. – Рыбинск, 1990. – 272 с. 8. Лукьяненко В. И., Кулик П. В. Физиолого-биохимическая и рыбоводная характеристика разновозрастных производителей волго-каспийских осетровых рыб. – Рыбинск, 1994. – 270 с. 9. Долидзе Ю. Б. Биохимический состав крови производителей севрюги в ближайший преднерестовый период // Экологическая физиология и биохимия рыб: Тез. докл. IV Всесоюз. конф. – Астрахань, 1979. – С. 85–86. 10. Субботкин М. Ф. Динамика содержания бета-липопротеидов у русского осетра в связи с развитием половых продуктов // Осетровое хозяйство внутренних водоемов СССР: Тез. докл. II Всесоюз. совещ. – Астрахань, 1979. – С. 253. 1. Статья поступила в редакцию 26.03.2008 20 РЫБНОЕ ХОЗЯЙСТВО USE OF THE HEMATOLOGIC CHARACTERISTICS TO SELECT PISCICULTURAL PRODUCTIVE STURGEON FEMALE AND MALE Yu. N. Grozesku, A. A. Bakhareva During the investigations, held in 2006–2007 at the sturgeon fish hatchery "Lebyazhiy" in Astrakhan region, it was determined that the sturgeon spawners, stored in different periods, differ in their physiological state. Sturgeon female and male of winter period, positively responded to the hormonal stimulation, differed from the spawners of spring period in high rate of hemoglobin, hematocrit, β-lipoproteids. The spawners, which hadn’t put reproductive product, had low rate of hemoglobin, increase of erythrocyte sedimentation speed and also rise of the level of crude protein in blood and β-lipoproteid serum. Key words: physiological state, female, male, sturgeon, winter period, spring period, hormonal stimulation. 21