растворимые коллагены и их применение в тканевой инженерии

“КЛЕТОЧНЫЕ КУЛЬТУРЫ”
ИНФОРМАЦИОННЫЙ БЮЛЛЕТЕНЬ. ВЫПУСК 24. ИЗД-ВО САНКТПЕТЕРБУРГСКОГО ПОЛИТЕХН. УН-ТА, СПБ, 2009, 69 С.
Бюллетень предназначен для широкого круга читателей в области клеточной биологии,
биотехнологии, медицины, фармакологии.
Составитель и ответственный редактор: М.С. Богданова. Редакционная коллегия:
Г.П. Пинаев, М.С. Богданова, Г.Г. Полянская.
СОДЕРЖАНИЕ
ОСНОВНЫЕ НАПРАВЛЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ НА КЛЕТОЧНЫХ КУЛЬТУРАХ
В УЧРЕЖДЕНИЯХ РОССИИ
ДЕЙСТВИЕ ГИПОКСЕНА НА АКТИВНОСТЬ НЕКОТОРЫХ ФЕРМЕНТОВ ЭНЕРГЕТИЧЕСКОГО
МЕТАБОЛИЗМА В КЛЕТКАХ ВНК-21 И ЭРИТРОЦИТАХ ЧЕЛОВЕКА
Е.А. Косенко1,2, Э.И. Лежнев1,2, И.И. Попова1, В.П. Лавровская1,2, А.С. Шумилов1,2,
М.А. Абрамова1,2, М.К. Кузьмич3, В.Г. Попов3
1Институт
2Пущинский
теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино;
государственный университет; 3ЗАО Корпорация «Олифен», Москва
КАРИОТИПИЧЕСКАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ В КЛЕТОЧНЫХ ЛИНИЯХ И СТРУКТУРА
КАРИОТИПА
Г.Г. Полянская
Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург; poljansk@mail.cytspb.rssi.ru
РАЗРАБОТКА МОДЕЛИ ВЗАИМООТНОШЕНИЯ ВИРУСА ГРИППА А С ПЕРЕВИВАЕМЫМИ
ЛИМФОБЛАСТОИДНЫМИ КЛЕТКАМИ ЧЕЛОВЕКА ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИХ
ОСОБЕННОСТЕЙ ВИРУСА И ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ АНТИВИРУСНЫХ ПРЕПАРАТОВ
Т.Д. Смирнова,* Т.М. Гудкова,* И.К. Кузнецова,* Г.А. Рыжак**
ГУ НИИ гриппа РАМН,* Санкт-Петербургский институт биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН**,
cellcultures@influenza.spb.ru
СТВОЛОВЫЕ КЛЕТКИ: ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В ФУНДАМЕНТАЛЬНОЙ КЛЕТОЧНОЙ
БИОЛОГИИ И МЕДИЦИНЕ
ПОТЕНЦИАЛЬНАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ОБВОЛАКИВАЮЩИХ ОБОНЯТЕЛЬНЫХ ГЛИОЦИТОВ
В ВОССТАНОВИТЕЛЬНОМ ЛЕЧЕНИИ ПОРАЖЕНИЙ СПИННОГО МОЗГА И
ПЕРИФЕРИЧЕСКИХ НЕРВОВ
В.И. Цымбалюк, В.М. Семенова, В.В. Медведев
ГУ «Институт нейрохирургии им. акад. А.П. Ромоданова АМН Украины», Киев
ИССЛЕДОВАНИЯ НА КУЛЬТИВИРУЕМЫХ КЛЕТКАХ И ТКАНЯХ РАСТЕНИЙ
ВЛИЯНИЕ АУКСИНОВ НА СИНТЕЗ И КАЧЕСТВЕННЫЙ СОСТАВ ГИНЗЕНОЗИДОВ В
КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК ЖЕНЬШЕНЯ
И.Н. Смоленская, Ю.Н. Смирнова, О.В. Решетняк, А.В. Носов
Институт физиологии растений им. К.А. Тимирязева РАН, Москва, ismolenskaya@ippras.ru
РАЗРАБАТЫВАЕТСЯ ПРОБЛЕМА
УСЛОВИЯ НЕЙРАЛЬНОЙ ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ
КЛЕТОК IN VITRO ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ ВЛИЯНИЯ ИХ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ПРИ
ДЕМИЕЛИНИЗИРУЮЩИХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ ЦЕНТРАЛЬНОЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ
И.В. Пыко1, Я.М. Мотузова1, А.С. Федулов1, С.А. Гузов 1, Д. Б. Нижегородова2,
М.М. Зафранская2, З. Б. Квачева3
1Белорусский
государственный медицинский университет, 2Белорусская медицинская
академия последипломного образования, 3Научно-исследовательский институт
эпидемиологии и микробиологии МЗ Республики Беларусь, Минск
ХРОНИКА
КОНФЕРЕНЦИИ, ПРОВЕДЕННЫЕ В 2008 ГОДУ
В октябре 2008 года в Санкт-Петербурге в Институте цитологии РАН была проведена
Школа-конференция для молодых ученых «Методы культивирования клеток».
Организаторы Школы – Научный совет РАН по клеточной биологии и иммунологии, Институт
цитологии РАН, Ассоциация специалистов по клеточным культурам, Общество клеточной
биологии и Общество биотехнологов России.
Решение Школы-конференции для молодых ученых
«Методы культивирования клеток»
1. Участники Школы одобряют практику проведения подобных школ-конференций для
молодых ученых, которые способствуют установлению реальных контактов между
представителями молодого поколения исследователей разных научных центров
России и стран СНГ.
2. Предствленные материалы и оживленные дискуссии по заслушанным докладам на
круглых столах свидетельствуют о крайней небходимости повышения методического
уровня исследований, проводимых на клеточных культурах для решения проблем
молекулярной и клеточной биологии, генной инженерии и создания новых
биомедицинских технологий с использованием стволовых и других типов клеток
человека.
3. Участники Школы выразили обеспокоенность по поводу практически полного
отсутствия в стране специальной подготовки кадров в данной области. В связи с
этим, они рекомендовали Институту цитологии РАН и Ассоциации специалистов по
клеточным культурам регулярно, не реже одного раза в три года, проводить школы,
посвященные
разным
аспектам
использования
клеточных
культур
в
фундаментальных и прикладных исследованиях.
4. Участники Школы выразили благодарность организаторам за проведение данного
мероприятия, поскольку оно продемонстрировало, что такие встречи с опытными
специалистами способствуют повышению профессионального уровня молодых
ученых и стимулируют дальнейшее развитие исследований в области биологии
клетки в культуре в нашей стране.
В декабре 2008 года в Китае (Фошан) состоялся 1-й ежегодный «Международный
конгресс по регенеративной медицине и стволовым клеткам».
К О Н Ф Е Р Е Н Ц И И 2009
25-30 мая 2009 г. на Украине (Новый Свет, Крым) состоится конференция:
«Фундаментальные и прикладные вопросы получения и применения биологически
активных веществ». Оргкомитет: тел: плюс 38-050-653-55-92.
http://www.bioactive.science-center.net
23-27 июня 2009 г. в Казани в рамках 4-го Российского симпозиума «Белки и
пептиды» планируется провести конференцию-школу молодых ученых.
Информация на сайте: www.belpep.ru
21-23 августа 2009 г. в Китае (г. Далиан) состоится 2-й Конгресс по регенеративной
медицине и стволовым клеткам. Подробную информацию можно получить на веб-сайте:
http:// www.medbioforum.org/rmsc2009/
31 авг. – 6 сент. в Новосибирском научном центре в Академгородке состоится
конференция «Хромосома 2009». Регистрация участников конференции проводится на
официальном сайте конференции: http://www.chromosome2009.org
12-14 октября 2009 г. в Санкт-Петербурге в Институте цитологии РАН состоится
Всероссийский симпозиум по биологии клетки в культуре на тему: «Культивируемые
клетки как основа клеточных технологий».
На
симпозиуме
предполагается
обсудить
следующие
вопросы:
выделение,
культивирование и дифференцировка эмбриональных стволовых клеток и стволовых клеток
взрослого организма человека и животных; молекулярные механизмы регуляции клеточного
цикла и специализации стволовых клеток; роль микроокружения и межклеточных
взаимодействий в пролиферации и дифференцировке стволовых клеток in vivo и in vitro; роль
стволовых и других клеток в процессах регенерации органов и тканей у позвоночных и
беспозвоночных животных; проблемы клеточной инженерии и создание трехмерных матриц
для получения тканеподобных структур; создание клеточных продуктов на основе разных
типов клеток и использование их в технологиях регенеративной медицины.
Информация представлена на сайте Института цитологии РАН:
http:// www.cytspb.rssi.ru
Контактные телефоны: (812) 297-18-59, 297-18-34, 297-18-42. Белозерская Наталья
Андреевна.
РАЗНОЕ
16 мая 2008 года исполнилось 80 лет Льву Петровичу Дьяконову - доктору
биологических наук, профессору, заведующему Отделом клеточной биотехнологии
Всероссийского научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии им.
Я.Р. Коваленко (ВИЭВ, Москва), руководителю Специализированной коллекции клеточных
культур с/х и промысловых животных, лауреату премии Совета министров СССР,
заслуженному деятелю науки РСФСР.
29 января 2009 года исполнилось 80 лет Георгию Петровичу Пинаеву - доктору
биологических наук, профессору, заведующему Отделом клеточных культур Института
цитологии РАН (Санкт-Петербург), заслуженному деятелю науки РФ, руководителю
Всероссийской коллекции клеточных культур, президенту Ассоциации специалистов по
клеточным культурам.
Вышел из печати сборник докладов школы-конференции для молодых ученых
«Методы культивирования клеток» под редакцией Г.П. Пинаева и М.С.Богдановой. Издво Санкт-Петербургского политехнического университета, СПб, 2008, 278 с.
В сборнике рассматриваются методы выделения, культивирования и анализа
поведения в культуре клеток человека, животных и растений. Специальное внимание уделено
особенностям культивирования клеток, выделенных из разных тканей в процессе получения
клеточных линий. Предложены критерии оценки стабильности клеточных линий при
изменении окружающей среды. Обсуждается роль клеточных культур в развитии
фундаментальных и прикладных исследований и в создании наукоемких клеточных
технологий. Приводятся примеры особенностей культивирования и использования стволовых
клеток в клеточной заместительной терапии. Подробно рассматриваются вопросы
криоконсервации
клеточных
линий,
выявления
микоплазменных
и
бактериальных
контаминаций, чувствительности клеток к вирусам и подготовки культуральной посуды.
Книга может быть выслана по почте наложенным платежом по заявкам, присланным по
электронной почте: pinaev@mail.cytspb.rssi.ru
В заявке необходимо указать фамилию, имя и отчество (полностью), почтовый адрес с
индексом и количество экземпляров.
ИНФОРМАЦИЯ АССОЦИАЦИИ СПЕЦИАЛИСТОВ ПО КЛЕТОЧНЫМ КУЛЬТУРАМ
Президент АСКК – д.б.н., профессор Георгий Петрович Пинаев. Тел./ факс: (812) 29742-96; e-mail: pinaev@mail.cytspb.rssi.ru
Информация Европейского общества тканевых культур (ЕОТК) находится на сайте:
http:// www.etcs.info. Президент ЕОТК - Dr. John Masters, e-mail: j.masters@ucl.ac.uk
Ежегодные членские взносы
В 2009 г. размер ежегодного членского взноса в Ассоциацию специалистов по клеточным
культурам - 100 р. (для студентов – 50 р.); размер членского взноса в Российское отделение
Европейского общества тканевых культур - 15 долларов. Взносы принимает казначей АСКК
Алла Ивановна Гусева.
Адрес: 194064. Санкт-Петербург, Тихорецкий пр. 4, Институт цитологии РАН.
Тел.: (812) 297-39-83; факс: (812) 297-03-41, 297-42-96; e-mail: msb@mail.cytspb.rssi.ru
ПРАВИЛА ДЛЯ АВТОРОВ
Статьи принимаются редакцией Информационного бюллетеня «Клеточные культуры» в
электронном и распечатанном вариантах. Электронный вариант статьи представляется на
дискете в одном файле формата Microsoft Word для Windows. При создании файла
необходимо соблюдать следующие требования:
 параметры страницы: поля: верхнее – 2,5 см, нижнее, правое и левое – по 2,1 см;
 от края колонтитула: верхнего – 1,8 см, нижнего - 1,25 см; размер бумаги: « А 4»;
 формат: шрифт - Arial Narrow, обычный, размер 13; выравнивание - по ширине;
 междустрочный интервал – полуторный, красная строка – отступ на 0,5 см.
Объем статьи не должен превышать 10 стр. В ссылках на литературу в тексте статьи
указываются номера работ в порядке их цитирования. В конце статьи приводится список
литературы.
На английском языке представляются: название статьи, ф. и. о. авторов, наименование
учреждения и краткое резюме.
К двум экземплярам текстового материала статьи и дискете с электронной версией
необходимо приложить направление статьи в редакцию бюллетеня от учреждения, в котором
выполнена работа. Все присланные в редакцию статьи проходят рецензирование и только
после получения положительных рецензий публикуются.
Адрес редакции:
194064 Санкт-Петербург, Тихорецкий пр., 4. Институт цитологии РАН
Составитель и ответственный редактор: Богданова Маргарита Станиславовна
Тел.: (812) 297-53-10, 8-911-284-28-64
Факс: (812) 297-03-41, 297-42-96
e-mail: msb2051@rambler.ru
“CELL CULTURES”
INFORMATION BULLETIN, ISSUE 24, ST. PETERSBURG, 2009
ESSENTIAL DIRECTIONS OF CELL CULTURE INVESTIGATIONS IN INSTITUTIONS
OF RUSSIA
Influence of the sodium polydihidroxyphenilenthiosulfonate on the activities of some
enzymes of energetic metabolism in BHK-21 cells and human erythrocytes
E.A. Kosenko1,2, E.I. Lezhnev1,2, I.I. Popova1, V.P. Lavrovskaya1,2, A.C. Shumilov1,2,
M.A. Abramova1,2, M.K. Kuzmich3, V.G. Popov3
1Institute
of Theoretical and Experimental Biophysics, RAS, Pushchino,
2Pushchino
3
State University, Pushchino
ЗАО Olifen corporation, Moscow
Effects of the sodium polydihydroxyphenylthiosulfonate (Hypoxen) on the activities of
glycolytic and antioxidant enzymes in human erythrocytes and BHK-21 cells were studied. It
was shown that Hypoxen did not alter ionic balance across the erythrocytic membrane and
seemed to be neither pro-oxidant nor antioxidant drug under normoxic conditions.The drug
rendered superoxide dismutase-like effect in the cells-free system. Hypoxen decreased
malate dehydrogenase, glutamate dehydrogenase and pyruvate kinase activities in BHK-21
cells. The inhibition of these enzyme activities depended on both Hypoxen and cell
concentrations.
THE KARYOTIPIC VARIABILITY AND THE KARYOTIPIC STRUCTURE
OF CELL POPULATIONS IN VITRO
G.G. Poljanskaya
Institute of Cytology RAS, St. Petersburg; poljansk@mail.cytspb.rssi.ru
Analysis of different types of karyotypic variability in the cell lines of the same origin affected
by one factor as well as in these cell lines affected by different factors suggests correlation between
a determined karyotypic structure and the character of karyotypic variability. Therefore in studies on
a putative genotoxic effect of various factors, both numerical and structural karyotypic variability
should be analyzed as the two sides of the same process. Enhancement of any type of the
karyotypic variability is associated with alterations of the balanced karyotypic structure induced by
the new cultivation conditions and hence by the changes in gene expression which provokes
alterations of other cell properties.
Development of the model of interaction of influenza A virus with
human lymphoblastoid cell lines for the study of biological features of viruses and
determination of activity of antivirals.
Smirnova T.D.*, Gudkova T.M.*, Kuznetsova I.C.*, Rhyzhack G.A.**
Research Institute of Influenza, RAMS *, Saint-Petersburg Institute of Bioregulation and Gerontology
NWB RAMS**. cellcultures@influenza.spb.ru
The model is developed based on human lymphoblastoid cell line, that allows to evaluate
the effect of influenza A virus on their state, in particular, rate of proliferation and level of apoptosis.
The state of the cells developed on the infecting dose: at high doses cytotoxic effect was observed
while at lowest doses of the virus cell proliferation was stimulated. T-lymphoblastoid cells (Jurkat)
appeared the most sensitive to stimulating action of the virus. B-lymphoblastoid cells (Namalva) and
histiocytes (U-937) were less sensitive. Their stimulation started at day 2 post infection (p.i.), cell
proliferation reached the peak on day 3 p.i.
Apoptosis was detected 24 hours later than cell stimulation. It was the most expressed in
Jurkat cells.
Different subtypes of influenza virus differed among each other in their ability to stimulate
cell proliferation and induce apoptosis. Viruses of H3N2 subtype were more active in comparison
with H1N1 ones.
The studied antivirals (Vilon, Epithalon, Arbidol and Ribavirin) demonstrated different
effects on different cell lines infected with influenza virus. Only in U-937 cells all preparations
suppressed virus- stimulated cell proliferation. Only Vilon and Epithalon decreased the rate of Tlymphoblasts (Jurkat) proliferation while the inhibition of virus-induced apoptosis was observed in
both cell lines in presence of all assayed preparations. The decrease of immunomodulating and
heroprotecting activity of Vilon, Epithalon and Arbidol was accompanied by loss of inhibiting effect on
virus-stimulated cell proliferation, while the drug- induced suppression of apoptosis was still
observed.
STEM CELLS: THEIR USE IN FUNDAMENTAL CELL BIOLOGY AND MEDICINE
BIOLOGY OF THE OLFACTORY ENSHEATHING CELLS IN VIVO AND IN VITRO
Tsymbalyuk V.I., Semenova V.M., Medvedev V.V.
Institute of neurosurgery named after acad. A.P. Romodanov of AMS of Ukraine, Kyiv
The issue considers modern conceptions of mammalian olfactory ensheathing cells (OEC)
properties. Taking into consideration the important role of this cell’s type in ensuring of axons growth
and the aim to restore spinal cord conduction after traumatic injury, new data of cultural properties and
molecular mechanisms of OEC proliferation, axonal growth and myelinization with the help of these
cells were analyzed.
DEVELOPMENT OF PROBLEM
Conditions for neural differentiation of mesenchymal stem cells for studying into influence
of their transplantation for demyelinating diseases of central nervous system
Pyko I. V.1, Motuzova Y.M.1, Fedulov A. S.1, Guzov S. A.1, Nizhegorodova D. B.2,
Zafranskaya M. M.2, Kvacheva Z. B. 3
1
Belarusian State Medical University, 2Belarusian Medical Academy for Postgraduate Education,
3Scientific
Research Institute for Epidemiology and Microbiology, Minsk, Belarus
Тел. +375297504352, E-mail: i_pyko@yahoo.com
Features and conditions of neural differentiation of human mesenchymal stem cells (MSC)
isolated from adipose tissue and bone marrow were studied. Preliminary results of neural
differentiation of MSC of bone marrow and adipose tissue were obtained. Further studies into
properties and potential for differentiation of MSC cultures and their characterization on the
presence of some specific cell surface markers inherent to neural cells are currently under
progress.
STUDIES ON CULTURED PLANT CELLS AND TISSUES
Auxin influence on ginsenoside Synthesis in cell suspension of Panax
Smirnova Yu.N., Reshetniak O.V., Smolenskay I.N., Nosov A.V.
Timiriazev Plant Physiology Institute, Russian Science Academy, Botanicheskay str.35, Moscow,123276,
Russia. Fax (095) 977 80 18, e-mail:ismolenskay@mail.ru
It is well known that growth regulaters and their ratio are the most important factors which determine the
possibility of isolated cell population to sustain. They influence on both cell growth and differentiation and
also on their metabolism. This effect is not only determined by this phytohormone specificity , but it also
depends upon the nature of secondary compounds, and sometimes it depends on the species of plants and
even on
the strain of cultivated cells. As the subject of our investigation we used Panax ginseng (
C.A.Meyer) and Pana[ japonicus cell suspension. The cell suspension was grown in MS nutrient medium
supplemented with the vitamins and phytohormones. HPLC-analysis only revealed some residual tracks of
ginsenosides When we used of media supplemented with 2,4-D as auxin, ginsenoside accumulation in
Panax ginseng suspension was nearly the same as in the control. When using 2,4-D, not all ginsenosides
were present in biomass, their ratio was not constant. When we changed 2,4-D for NAA, glycoalkaloid
biosythesis was in average 4% (CV=36), it was 17.2 times as high as in the media supplemented with 2,4-D
(table). The ginsenoside composition in P.ginseng cell suspension was complete ( all 7 ginsenosides) , the
ratio of individual ginsenosides turned out to be equal in all variants with NAA presence. The ratio of Rg/Rb
groups varied depending on applied auxin . In all variants with , it varied within the limit of 6.1 to 7.6. When
we used 2,4-D, it fluctuated. That could be explained by the instable synthesis and individual ginsenoside
composition.
MISCELLANEOUS
CHRONICLE
INFORMATION OF THE CELL CULTURE ASSOCIATION
INSTRUCTIONS FOR AUTHORS
The paper should not exceed 10 manuscript pages. The manuscript is to be accompanied by
recommendation addressed to the Editorial Board of the Information Bulletin from the institution in
which the work has been carried out. The paper should contain a brief resume, with the tittle of the
work, names of the authors, institution and city.
The manuscript is to be accompanied by its electron variant: one file in MS Word for Windows.
The file should have the font Arial Narrow, 13; interline difference – 1.5; the indented line – 0.5 cm;
the upper margin – 2.5 cm, other margins – 2.1 cm each. The file may be e-mailed to the address of
the Editorial Board.
Address of the Editorial Board
Dr. M. Bogdanova, Institute of Cytology RAS, Tikhoretsky Prosp. 4, St. Petersburg 194064,
Russia. Tel.: (812) 297-53-10, 8-911-284-28-64, fax: (812) 297-03-41,
e-mail: msb2051@rambler.ru