Краткий отчет о выполнении проекта, выполняемого в рамках ФЦП «Исследования... приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2014 – 2020»

Краткий отчет о выполнении проекта, выполняемого в рамках ФЦП «Исследования и разработки по
приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2014 – 2020»
<по этапу № 1, 2014 год >
Номер Соглашения о предоставлении субсидии: 14.604.21.0020
Тема: «Научное обоснование и экспериментальная разработка клеточной биотехнологии
программирования реверсивного фенотипа иммунных клеток для терапии рака»
Приоритетное направление: Науки о жизни; Критическая технология: Клеточные технологии
Период выполнения: 17.06.2014 – 31.12.2015
Плановое финансирование проекта: Бюджетные средства: 10,0 млн. руб.; Внебюджетные средства:
2,0 млн. руб.; Общее плановое финансирование проекта: 12,0 млн. руб
Получатель/Исполнитель: ГБОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический
университет имени А.И. Евдокимова» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Индустриальный партнер: ООО «Уай Ви Эм Корпорэйшн»
Ключевые слова: макрофаг, опухоль, репрограммирование, биотехнология, факторы транскрипции,
цитокины
1.
Цель проекта
1) Формулировка задач, на решение которых направлен реализуемый проект.
 Отработка in vitro способов программирования «реверсного» М1 фенотипа макрофагов,
обладающего способностью усиливать продукцию провоспалительных антиопухолевых
цитокинов в ответ на действие антивоспалительных проопухолевых медиаторов;
 Отработка способов введения репрограммированных макрофагов и оценка антиопухолевого
эффекта in vivo и in vitro на модели асцитной карциномы Эрлиха.
2) Формулировка цели проекта; продукта, создаваемого с использованием результатов проекта.
Разработка клеточной биотехнологии программирования реверсивного фенотипа макрофагов
для ограничения опухолевого роста.
2.
Основные результаты проекта
 Написан аналитический обзор в котором проанализированы механизмы формирования фенотипа
макрофагов, а также механизмы репрограммированния иммунных клеток при развитии опухоли.
 Обоснованы условия программирования фенотипа макрофагов для формирования «реверсного»
антиопухолевого фенотипа макрофага, способного усиливать продукцию антиопухолевых
факторов пропорционально действию проопухолевых факторов опухоли. Мы ожидаем, что это 1)
не только не позволит опухоли перепрограммировать макрофаг на проопухолевый М2 фенотип,
но и 2) адекватно усилит провоспалительное антиопухолевое действие макрофага именно в зоне
опухоли, а также 3) ограничит избыточное воспаление и повреждение тканей и 4) ограничит
активацию супрессорных Treg клеток и MDSC, которые подавляют антиопухолевый иммунитет.
 Отработаны процедуры репрограммирования фенотипа макрофагов на М1 фенотип. В проекте
будет использоваться комбинированная модель с использованием и пониженных концентраций
сыворотки и добавления IFN-γ. В такой модели активация IFN-γ сигнального пути может
увеличивать экспрессию ингибиторного SMAD7, который может препятствовать
фосфорилированию SMAD2/3. Этот эффект будет способствовать ингибированию TGF-β/SMADзависимого сигнального пути с помощью ингибиторов SMAD2/3/4/, которое мы будем проводить
на втором этапе создания реверсного фенотипа. Отработка модели была проведена на мышах
линий С57 и BALB/c.
 Получены данные о том, что уязвимость организма или вида к развитию опухоли может
предопределяться генетическими особенностями систем генерации NO. Продукция NO
макрофагами оценивалась спектрофотометрически, по содержанию нитритов в культуральной
Д1 к МУ
2




среде с помощью реакции Грисса. Содержание индуцибельной NO-синтазы оценивалось
методом Western blot. Полученные данные позволили сделать вывод, что, уязвимость организма
или вида к развитию опухоли может предопределяться генетическими особенностями систем
генерации NO. Факт важной роли NO в увеличении продолжительности жизни при наиболее
агрессивном виде опухоли карциноме, делает перспективным поиск новых подходов к лечению
опухолей с помощью манипулирования NO в зоне опухоли. Сопоставление наших данных и
анализ литературы, показывает, что ген и белок NNT и различия в SNP, обнаруженные у разных
сублиний C57BL/6 также заслуживают внимания при разработке новых методов
противоопухолевой терапии.
Проведены патентные исследования по теме «Новая стратегия иммунного подавления роста
опухоли на основе комплексного блокирования факторов транскрипции макрофагов: клеточная
биотехнология «умный макрофаг»». Сделан вывод о том, что тема охраноспособна.
Материально-техническое обеспечение работ было проведено в форме технического
обслуживания проточного цитометра и закупки расходных материалов и реактивов.
Достигнуты индикаторы и показатели результативности проекта в 2014 году, такие как «Число
публикаций по результатам исследований и разработок в научных журналах, индексируемых в
базе данных Scopus или в базе данных "Сеть науки" (WEB of Science) - опубликованы 2 статьи (2
статья включены в Scopus”; “Доля исследователей в возрасте до 39 лет - 66,7”; ”Объем
привлеченных внебюджетных средств - 0,8 млн. руб”; “Средний возраст исследователей – не
более 38,8” и “Количество мероприятий по популяризации результатов - 2: симпозиумы в
Балтиморе (США) и Суджоу (Китай)”. Таким образом индикаторы и показатели достигнуты.
Проведена модернизация лаборатории в форме установки кондиционеров и систем очистки
воздуха для обеспечения условий по культивированию клеток.
3.
Назначение и применение результатов проекта.
Результаты могут быть использованы в области медицинских биотехнологий лечения рака, а также
в образовательном процессе студентов медиков. Практическое внедрение результатов, оценка их
влияния на развитие научно-технических направлений; на развитие исследований в рамках
международного сотрудничества, развитие системы демонстрации и популяризации науки,
развитие материально-технической и информационной инфраструктуры будет возможным описать
в 2015 году.
Руководитель работ по проекту
Зав. кафедрой патофизиологии
И.Ю.Малышев
Д1 к МУ